Moorhead, K. A., L. A. Adamovicz & M. C. Allender (2024): Development and analytical validation of a novel quantitative PCR assay for the detection of Trachemys herpesvirus 1. – Journal of Virological Methods 327: 114941.
Entwicklung und analytische Validierung eines neuen quantitativen PCR-Tests zum Nachweis des Trachemys-Herpesvirus 1.
DOI: 10.1016/j.jviromet.2024.114941 ➚
Trachemys scripta elegans,
© Hans-Jürgen Bidmon
Neu auftretende Infektionskrankheiten sind eine Bedrohung, die zum weltweiten Rückgang der Chelonierarten beiträgt. Herpesviren gehören zu den einflussreichsten Krankheitserregern, die bei Cheloniern beschrieben wurden, und werden häufig mit einer Reihe von Erscheinungsformen bei verschiedenen Wirten in Verbindung gebracht, die zu schwerer Morbidität und Mortalität führen können. Das Trachemys-Herpesvirus 1 (TrHV1) wurde bei Rot- und Gelbwangen-Schmuckschildkröten (Trachemys scripta elegans bzw. Trachemys scripta scripta) nachgewiesen, ist aber noch weitgehend unerforscht. Invasive Rotwangen-Schmuckschildkröten können als Reservoir für die Übertragung auf sympatrische einheimische Arten dienen. Ziel dieser Studie war die Entwicklung eines empfindlichen und spezifischen quantitativen Echtzeit-PCR-Tests (qPCR) für den Nachweis von TrHV1-DNA, um die Epidemiologie dieses Virus bei Wasserschildkröten zu charakterisieren. Es wurden zwei TaqMan-MGB FAM-Farbstoff-markierte Primer-Sonden-Sets entwickelt und unter Verwendung von Plasmidverdünnungen bewertet. Der leistungsstärkere Assay war spezifisch für TrHV1-DNA und hatte einen linearen dynamischen Bereich von 1,0 x 10(7) bis 1,0 x 10(1) Kopien pro Reaktion mit einem R-2 von 0,999, einer Steigung von -3,386 und einer Effizienz von 97,39 %. Die Nachweisgrenze lag bei 10(1) Kopien pro Reaktion, und es gab keinen Verlust der Reaktionseffizienz bei Vorhandensein von TrHV1-negativer chelonian oral-cloacal DNA. Insgesamt erfüllt der Trachemys-Herpesvirus-1-Test die etablierten Kriterien für akzeptable qPCR-Tests und wird ein wertvolles Instrument zur Charakterisierung der Epidemiologie von Trachemys-Herpesvirus 1 bei den Schildkröten sein.
Galerien
Trachemys scripta elegans – Rotwangen-Schmuckschildkröte
Trachemys scripta scripta – Gelbwangen-Schmuckschildkröte